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失婚的雷小凤是商场管理公司CEO苏大同的秘书，亦是公司中的秘书头，已在公司效力多年，深得苏的信任。苏看似懦弱怕事，实质满腹大计和夺权野心，借助仗义代他出头的凤为秘书头之力监管经理的一举一动，令凤予人“揸住鸡毛当令箭”的印象。办公室是凤展现权力的舞台，一枱一凳、一草一木皆由凤规管，所有规矩由凤订定兼解释，凤深知众人弱点，懂得不越权却又令众人臣服其下，整个办公室犹如凤的“女王办公室”，公司上下皆对其又惊又怕。
母女重逢斗气连场
公司宣传部将有新经理上任，凤为其招聘秘书时，遇上了单亲爸爸施拾壹，因着各种原因，本来看似绝不胜任的壹，竟被聘为秘书。一个男人，处身女人主导的秘书世界，发生连串风波。凤巧施妙计平息风波，却没想到，新任宣传部经理，竟是阔别多年的女儿缪惜之。
惜与凤分别多年，母女重逢原本值得高兴，惜却对凤表现冷淡。惜职位上比凤更高，看不惯凤订下的各种规矩，又不满凤当日对父亲决绝，却又对只属外人的一众秘书关怀备致，公事上「逢妈必反」，处处与凤对着干，更故意公开两人关系，令凤又恼又恨。
凤为了控制惜，派滑头男秘书壹去看管之，惜眼见凤对壹份外关照，心中不是味儿，便对壹更差，挑剔之、折磨之，惨成凤、惜磨心的壹，为了保住生计，只得哑忍。
公共屋村左邻右里
强悍背后，凤回到家中却甚为孤独，公屋出身的她，早年结婚后诞下惜，一家三口乐也融融，凤亦自觉事业与家庭皆能兼顾，奈何实情非她所想。凤后来发现丈夫搞婚外情，心碎离婚。惜痛恨凤的固执令家庭破碎，毅然随父移民美国，剩下凤一人独居距公屋外家一街之隔的私人屋苑。惜回港后亦搬入凤家中居住，但只当母亲同屋主，母女相处如贴错门神。
凤的兄长雷小龙与妻子万如珠及儿子雷宇一家三口则居于兄妹昔日合资购入的公屋单位，龙凤兄妹情深，凤每晚皆会前往龙家吃晚饭，独身的凤更把龙家当成自己的家一样，将办公室的一套管理守则带往外家，对龙一家规管甚严，更安排吊儿郎当的侄儿宇在其公司任办公室助理，如同家中女王，惹来其嫂珠的不满。
凤与左邻右舍相识多年，只是凤即使下班，仍不脱女王本色，凤渴望了解女儿惜，又碍于面子搁不下，只得与惜青梅竹马的巴士迷宅男凌笑淇作母女桥梁，自幼丧母的淇，不自觉把看着他长大的凤当作母亲投射；淇与惜重逢后，经惜介绍亦加入凤的公司，情同手足，相处日久，却在不知不觉中，爱上了把他当作兄弟的惜。
丧妻后与一对三岁孖生女儿相依为命的壹，终于申请到公屋，一家三口搬入屋村新居，壹为了找人照顾孖女，也落力打好邻居关系。惜与壹相处越久，越发现壹的优点，眼见壹对女儿疼爱有加，也对壹越来越欣赏。
众人在办公室建立了感情，下班后众人又聚首于公共屋村，关系就如家人一样，但在办公室之中，却又要连番角力。
汪明荃饰雷小凤
简介 52岁，CEO秘书
杜汶泽饰施拾壹
简介 30岁，宣传部秘书
何韵诗饰缪惜之
简介 28岁，宣传部经理
吴卓羲饰凌笑淇
简介 28岁，宣传部行政助理
陈山聪饰雷宇
简介 29岁，办公室助理
张国强饰苏大同
简介 50岁，商场管理公司行政总裁
林利饰赵展鹏
简介 租务部经理
艾威饰夏理迅
简介 40岁，物业管理部经理
马赛饰张美君
简介 23岁，租务部经理秘书
吕慧仪饰宋初敏
简介 25岁，物业管理部经理秘书
刘江饰雷小龙
简介 60岁，退休消防员
卢宛茵饰雷万如珠
简介 58岁，家庭主妇
郭峰饰凌铎
简介 50岁，厨师
邓梓峰饰邬尚邦
简介 45岁，商城创办人
李家声饰秦博士
简介 35岁，铎记小厨员工
陈爽饰白米
简介 24岁，国内硕士毕业生
金刚饰陈永仁
简介 27岁，商场宝安
雷小凤
演员汪明荃
个性硬颈顽固，坚持原则，遵守本份，要求零瑕疵。待人以忠诚为先，因此难以容忍任何出卖与欺骗。以大家姐自居，爱面子，不肯认低威，喜欢照顾别人，甚至偏向控制，其实一切皆出于寂寞。外表硬净，实则滥情，容易心软。
凤早年结婚后，与丈夫育有一女缪惜之，凤凡事坚守原则，其夫则是游戏人间的差不多先生，形成互补的夫妻组合。幸福家庭于惜十二岁时剧变，凤忙于为事业拼搏之时，竟发现丈夫贪玩出轨。尽管丈夫后悔莫及，连声道歉，但凤难以容忍婚姻有瑕疵，愤而离婚。惜不理解凤为何宁愿牺牲家庭，坚决不肯原谅父亲，选择随父移民美国，母女逐渐失去联络。
凤自力更生，于一间商场管理公司担任秘书，尽忠职守，细心体贴，深得上司信任，跃升为公司大秘书。凤服侍直属上司苏大同已有十年，以为苏是努力实干的老好人，只是太心软与懦弱而被人欺负。凤于是成为强势秘书，力保苏的权力，并对苏产生微妙感情，苏终于凭实力扶摇直上，晋升行政总裁，凤实功不可没。
陈永仁
演员金刚
乐天随和，容易相处，风趣幽默，做事勤快敏捷，对人没有太大的机心，很容易与人成为朋友，颇重情义，乐于助人，不会斤斤计较，极受街坊及同事欢迎。
仁来自台湾，自小是孤儿，被遗弃在孤儿的门外，很小就学懂独立生活，心底对亲情极为渴望，遂对身边的人都很好，加上长得一副没有杀伤的力的样子，一口的半咸不淡的广东话又非常惹笑，更令他变得很有人缘。他起初只在屋村当保安，及后找到商场保安这份差事，由于健谈，公司上下都喜欢跟他说笑。
仁在小时候以小豆丁的艺名当过童星，并引以为傲，每每遇有街头访问或新闻采访，仁都会第一时间飞扑上前或主动接受访问来搏取上镜的机会。虽然事后会被同事们取笑一番，但仁仍乐此不疲。其实，仁是另有目的，小豆丁原来是他被遗下在孤儿院外时留下的名字。仁后来得知孤儿院曾经收过一封从香港寄去的信件查询有关他的事情，仁相信亲人一定是来了香港，便特意从台湾过来香港，借工作为名，寻亲为实。
施拾壹
演员杜汶泽
面懵心精，口齿伶俐，脑筋灵活，观察力强，反应迅速。韧力十足，任劳任怨。笑骂由人，面皮几丈厚，胸襟广阔，从容豁达。饮水思源，有恩必报，珍惜友情，不记隔夜仇。重视亲情，视一对孖生女儿为命根，为了爱女可以牺牲一切，底线是没有底线。
壹原本受雇为一富商当司机，因每天接载富商独生女日久生情，但被富商得悉棒打鸳鸯！壹为捍卫爱情，偕妻返回出生地香港生活。妻子未几即诞下双胞胎女儿施瑶和施蓓，一家四口虽不富裕，但乐也融融，谁料妻子在一次意外中身死，遗下壹和孖女相依为命。
祸不单行的事接踵而来，外父誓要争夺孙女抚养权。壹爱女情切，不惜与外父对薄公堂，在法庭上遭外父所聘律师团贬得一文不值，尤幸法官以亲情可贵判壹胜诉，但提醒壹必须要有收入来提供安稳生活给两个女儿，否则将会失去监护人资格。
夏理迅
演员艾威
看风使舵，信口开河，夸夸其谈，以鹏为马首是瞻，有大食大，有鞋擦鞋，有功邀功，有鑊卸鑊，见人讲人话，见鬼讲鬼话。恃住识少少健身知识，借故亲近异性，乘机揩油，兼食豆腐。工作态度轻浮，矫饰伪行，说话不著边际，讲就天下无敌，做就永不积极。
草根阶层出身，从少便有出人头地的愿望，可是志大才疏，空有理想但欠缺实力，读书成绩中规中矩，中学毕业後便出来社会工作，早年获聘用成为Selection公司文员，经过二十年的努力，终於坐上了物业管理部经理一职。
从文员做到经理二十年的岁月中可谓饱经风浪，见尽办公室政治的黑暗，深明枪打出头鸟的道理，所以凡事从不出头，只会摆别人上台，怂恿别人行先死先，自己就企两边。他懂得避重就轻，深懂拍马屁之道，在以凤为首的秘书党和自己身处的经理党之间游走，既能讨好鹏又不得失凤而左右逢源。他并会夸张地解读凤的说话，令到情况变成灾难，到无法收拾时就会悄然抽身，留下一堆烂摊子给别人收拾。对事业已经没有抱负，只当是一份糊口的工作，他惧怕被炒，抱少做少错，不做不错的态度办事。
苏大同
演员张国强
外表老实，面带笑容，公事少谈，永远说着毫不相干的冷知识，看似善良而软弱无能，典型容易被欺负的类型，一直被人轻视，实则笑里藏刀、攻于心计、野心极大。
苏深明做人不能锋芒太露，实力就是向上爬的利刃，于是他踏实地工作，不主动标榜自己却技巧地矮化别人，为自己的履历表添上了好成绩，慢慢由中层管理人员攀升至今日行政总裁之位。
苏位高权重，却仍然隐藏自己充满机心的一面。他装成一个外表懦弱、容易心软的老好人。他最爱在开会时说着风马牛不相及的冷知识，说出来言之凿凿，真假难分，同事们只觉他懒叻得来不对题，冠以例知绰号，不由得看轻他，甚至把他的话当作耳边风，对他疏于提防。
白米
演员陈爽
思想单纯、心地善良、温婉可人、乐于助人，对人没有戒心，不会计算别人，有时被人讨了便宜也不自觉
白米是国内硕士毕业生，姻缘巧合下结识了因工作关系由香港来的士，士虽然比自己年长十多年，但米偏偏欣赏士成熟大方不怕吃亏的性格，很快就跟士堕入爱河，继而结婚。由于夫妻不想异地相隔，米毅然放弃国内一份有前途的工作，申请到港定居。
米到港后才发现原来丈夫一直只是向自己吹嘘、作大，根本不是什么专业人士，也没有住大屋。米发现真相后不但没有怪责丈夫，眼见丈夫工作辛苦，更希望为丈夫分担经济压力，于是出去找工。辗转之下，米投身管理公司任职高层、赚得可观的工资。米一心以为可以减轻丈夫负担，却没料到道这种做法反而令士更添压力、更加自卑，女尊男卑的关系，令米、士二人闹出不少笑话。
为汪明荃度身订造的《女王办公室》是无线送给她新婚的“娘家大礼”，但她所演的“Queen姐”雷小凤，却与过往众多剧集中饰演的性格一致，不少网民留言狂轰她的“野蛮奶奶”式演技无新意。其实，该剧有不少新鲜看点，如首度参演TVB剧的杜汶泽，破格出演夹在女强人之间的贱格小男人，而饰演汪明荃女儿的何韵诗，也令观众感觉新鲜。（南方都市报评）
汪明荃饰演的“办公室女王”并不是预料中的强势“女魔头”，反而像“居委会大妈”，事必躬亲，与杜汶泽的“斗法”惹人捧腹。（金羊网评）
看得出汪明荃很努力想摆脱“野蛮奶奶”形象，不过横看竖看，她还是挺“野蛮奶奶”。毕竟，她始终不是李司棋。《女王办公室》中的汪明荃极力摆脱野蛮形象，可惜戏外的她却是名副其实的霸气女王，不过这霸气犹如两面刃，亦曾为此惹来不少非议。（新快网评）
歌曲歌手作曲填词类型
挨（捱）吴卓羲、杜汶泽、何韵诗邓智伟、陈诗慧陈诗慧主题曲
爱作战何韵诗邓智伟陈少琪片尾曲
吴卓羲在香港旺角某商场拍外景时肥鸡扮相，因后台地方狭窄，连转身都有困难。
吴卓羲、何韵诗、马赛与杜汶泽为电视宣传时，由于汪明荃正在旅行而缺席，但剧组拿出她的纸板公仔出来造势，每位演员轮流与“纸板阿姐”对话，场面搞笑。
《女王办公室》是汪明荃婚后首部电视剧。