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1985年，在电影《大上海1937》中饰演大反派杜月笙，并担任动作指导。1987年，与张彻导演合作，在电影《过江龙》客串角色，并担任动作指导。
1989年，在吴宇森执导的动作电影《龙蛇争霸》中饰过江龙。1990年，出演电影《江湖奇兵》，饰施直。1992年，在电影《西行平妖》中饰沙僧，并担任动作指导；同年在张彻执导电视剧《刺马》中扮演角色蓝如龙。
1993年，在电影《神通》中担任动作指导，并客串角色土童。1995年，在张丰毅主演的作品《日光峡谷》中担任动作指导。
1997年与演员何静、刘金山合作，出演电视剧《天堂隔壁》，饰演法师。1998年，在央视版电视剧《水浒传》第七集《风雪山神庙》中客串角色，饰沧州差拨。
2001年，在王维明执导电视剧《永不回头》中饰演大炮仗；出演徐锦江主演的20集电视剧《金搏虎》，客串角色彭英；在管虎执导的电视剧《黑洞》中饰演陆西明。
2002年，在管虎执导的36集电视剧《冬至》中，扮演角色柯镇华；同年在张卫健主演电视剧《少年张三丰》中，杜玉明饰反一号逍遥王。
2003年，在苏有朋主演电视剧《倚天屠龙记》中，扮演角色鹿杖客。
2004年，在马伊琍主演的电视剧《七日》里饰演钱世宏；同年在孙海英主演的电视剧《誓不罢休》中饰演林大宝。
2006年，在吴秀波主演的电视剧《新英雄虎胆》中饰演秃鹰；同年在公安题材电视剧《29天半》中饰反派角色大头；同年在28集抗战电视剧《暗哨》中扮演释逊（幽灵）；同年在大陆电视剧《七剑下天山》中饰演反派角色老大；同年在军事谍战戏《新虎口脱险》中饰反派角色郎鹏。
2007年，在大陆电视剧《生死桥》中客串角色黄盛轩；同年在电视剧《康熙微服私访记》第四部中饰苏里图。2008年，在王晶执导的年度大戏《十大奇冤》中客串阎王债主。
2010年，在丁晟执导的电影《大兵小将》中饰侍卫武；同年在电视剧《雪豹》中担任副导演和动作指导；并饰演角色朱子明；同年又在30集电视剧《决战华岩寺》中饰演了空大师。
2011年，在李仁港执导的电影《鸿门宴》中饰龙且；同年在丁晟执导，刘烨、焦恩俊主演的电影《硬汉2》中客串角色惠哥。同年在张若昀、李曼主演的电视剧《黑狐》中饰演洪宝顺。
2012年，在32集喜剧电视剧《嘉定寻宝记》中客串角色四哥。
2014年，参演了电视剧《千手千眼》；同年出演“民国版杨门女将“《嫂子嫂子》；同年12月加盟古装穿越大片《新步步惊心》。
2016年，参演电影《夜魔人》饰演心理教授白书和；同年加盟郭靖宇新剧《娘道》，饰演鬼见愁。
2017年8月，参演玄幻电视剧《将夜》，剧中饰演莲生大师。9月，参演的热血史诗大剧《霍去病》杀青，剧中饰演忍冬营百人屯长留柱。
2018年7月，参演的电视剧《媚者无疆》开播，剧中饰演正义山庄庄主黄喻。月14日，参演的网络剧《夜天子》开播，剧中饰演蛊神教三长老。8月，继鹿杖客、胡青牛之后，三度参演金庸武侠改编剧《倚天屠龙记》，剧中饰演少林寺高僧渡厄。
2019年10月，参演的电影《疯狂的王二》开机。11月，参演电视剧《庆余年》。
善始善终2019-08-21
饰演杜山迪导演宋凯主演秦俊杰
将夜2019
饰演莲生大师导演杨阳主演陈飞宇，宋伊人
霍去病2019
饰演留柱导演张健主演张若昀
倚天屠龙记2019
饰演渡厄导演蒋家骏
主演曾舜晞，陈钰琪
庆余年2019
饰演洪四庠
古董局中局2018-12-26
饰演大GOU导演五百主演夏雨
媚者无疆2018-7-24
饰演黄喻
易军
主演李一桐，屈楚萧
夜天子2018
饰演蛊神教三长老导演陈皓威主演徐海乔，宋祖儿
娘道2017
饰演鬼见愁导演郭靖宇，巨兴茂主演岳丽娜，于毅
黑狐之风影2016-05-12
饰演洪宝顺导演王德庆主演王梓桐
豹子头林冲2019-05-25
饰演高俅导演赵聪主演于震，张正阳
夜魔人2016-9-9
饰演白书和导演张坤一主演维妮，鹿凌桀
花招2016
导演张少军主演涂圣成，刘芳毓
按摩侠之大哥驾到2016
主演句号，李勤勤
墓穴迷城2015-9-18
饰演神铲邱导演宁敬武主演谢君豪
新步步惊心2015-8-7
饰演季狸导演宋迪主演陈意涵，窦骁
九纹龙史进之大破瓦罐寺2015
饰演老洪导演刘信义主演朱晓辉
时光恋人2013-9-6
饰演猫头鹰导演沈东主演李小璐，方中信
侠捕2013
饰演左文升导演马中轩，吴樾主演吴樾，宣璐
石将军石勇2012
导演刘信义主演樊少皇，卢星宇
杜玉明一路走来，他已经演绎了不下数十位让观众印象深刻的恶人。这使得杜玉明当之无愧地成为国宝级“坏蛋”，也成了演坏人中的戏骨级演员。（新浪评价）
杜玉明，荧屏上的“冷面双侠”之一，身手不凡，独具特色的外形和“心狠手辣”的表演，也让他成为了深入人心的“金牌反派”。（网易娱乐评价）
