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2000年，周显欣从华西医科大学毕业后，被分到了广州的一家制药厂，在学校就是文艺部长的她，实在受不了沉闷的气氛。刚好这个时候日本富士电视台在广州举行选美比赛，抱着试一试的态度去参加的她却捧回了冠军奖杯，并赴日本进行文化交流。回到广州后，周显欣辞掉了药厂的工作，开始专心向演艺方面发展：接拍广告，在电视台当主持人等，算是正式进入了演艺圈。同年，“弃医从艺”的周显欣选择在中央戏剧学院表演系继续修读研究生。
2002年，出演孙周执导的爱情片《周渔的火车》，在片中担任巩俐的文戏搭档；随后，主演毛卫宁执导的侦探剧《誓言无声》，在剧中饰演空姐许婉云，该片获中国23届金鹰奖、飞天奖长篇电视剧一等奖；同年，主演抗战片《红河劫》，在片中饰演英勇坚韧的民族女英雄梅措，该片获CCTV-6电影频道“最佳民族电影”奖。
2003年，主演乔梁执导的剧情片《都市没有地平线》，在片中饰演努力勤奋的都市女青年林小丹，该片获中国大学生电影节“十佳数字电影”奖；随后，与佟大为、孙俪、郭晓冬、杨幂出演改编自作家张恨水的长篇章回小说《满江红》的历史爱情剧《红粉世家》，在剧中饰演秦淮歌妓唐艳秋的女儿苏琪。
2004年，搭档张敏、吴奇隆出演黄健中执导的民国武侠剧《风满楼》，在剧中饰演容貌美丽、性格颇具野性茹月。
2005年，主演郑保瑞执导的惊悚片《怪物》，在片中饰演温柔善良的时尚女编辑陈丽；同年，主演沈雷执导的爱情剧《爱本无罪》，在剧中饰演才情兼备的都市白领丽人吴依凡，并凭借该剧获得浙江省第十六届电视“牡丹奖”杰出演员奖。
2006年，出演罗棋、沈志豪联合执导的惊悚片《鬼厉魂》，在片中饰演侠义果敢的江湖侠女小玉；同年，周晓文执导的悬疑剧《逃亡香格里拉》，在剧中饰演云南大翡翠商知性温婉的女儿潘竹香。
2007年，出演黄健中执导的爱情剧《雾柳镇》，在剧中饰演柳记米店老板风情泼辣的大女儿柳大红。2008年，主演悬疑片《雪地疑案》，在片中饰演睿智敏锐的高才女警官郑敏；同年，主演黄祖权执导的古装动作片《小李广花荣》，在片中饰演色艺超群的歌妓潇潇；同年，张鑫执导的电视剧《沧海一粟》，在剧中一人分饰两角，分别饰演了陈晓君和葵花。
2009年，搭档王学兵、孙海英主演江海洋执导的文艺片《高考1977》，在片中饰演上海女知青陈琼，该片获第13届华表奖优秀故事片大奖和第18届金鸡奖上获得最佳编剧奖与最佳影片提名以及第五届中美电影节上获得“金天使”大奖；同年，主演刘新执导的中国国内首部侦探悬疑推理剧《侦探小说》，在剧中饰演美丽大方、才情出众、生活优越的报社编辑唐梦云。
2010年，搭档吕良伟出演张鑫执导的剧情片《河长》，在片中饰演张秋江的女朋友陈晨；同年，领衔主演话剧《意外来客》获得满堂彩，备受上海话剧迷们的青睐（该剧于2012年在上海巡回演出）。
2011年，主演叶伟英执导的恐怖片《午夜凶梦》，在片中饰演深受怪梦侵扰的外科医师方蕾。
2012年，周显欣化身“俄罗斯女郎”在东方卫视《舞林大会》以一曲《莫斯科的夜》挑战标准恰恰，而周显欣表演上的一点小失误也让她成为了全场“最有争议”的选手，引发评委意见大相径庭；6月，受邀担任CCTV智慧型文化节目《谢天谢地，你来啦》嘉宾；9月，搭档王丽云、李勤勤、柳岩出演王志军、金雷联合执导的都市家庭轻喜剧《岳母的幸福生活》，在剧中饰演性格斯文的建筑事务所文员申兰；10月，出演延艺执导的革命史诗剧《国家命运》，在剧中饰演勤勉知性的女科学家秦小阳。
2013年，搭档刘蓓、姚橹主演延艺执导的家庭剧《你是我的亲人》，在剧中饰演善良知性的女教师李淑霞；11月，与于震、乔振宇出演王新民执导的古装传奇商战剧《大盛魁》，在剧中饰演皇商孙家的小姐孙香玉。
2014年，与田亮、李菁出演由车径行执导的民国悬疑动作片《国宝疑云》，在片中饰演被绑架险成压寨夫人、到红妆出逃、再到误入青楼的香云；6月，主演刘心刚执导的金融谍战剧《金战》，在剧中饰演资本家出身的金融专家罗天晴。
2015年，搭档王志飞、江珊主演婚姻伦理剧《婚姻时差》，在剧中饰演拆散了吴婷和李海这对多年恩爱夫妻的小三赵晓菲；6月，主演张晓光执导的都市情感喜剧《给幸福下订单》，在剧中饰演妇产科医生柳悦；7月，出演吴子牛执导的古装历史剧《大舜》，在剧中饰瞽叟的相好季好。
2016年，与惠英红、韩朔主演由周振荣执导的悬疑片《抓狂》，在片中饰演因一起交通意外产生双重人格的任宝儿；10月，主演根据小说《逃生》改编的爱情片《香珀》，在片中饰演野性美丽、善良忠贞的少妇兰香；随后，担任警匪缉毒剧《卧虎》编剧。
2017年，主演的电影《云在故乡等我》入围中国金鸡百花电影节。
2018年，参演抗战剧《鸿雁》；12月，参演的电视剧《那座城这家人》播出。
2021年，参演的《觉醒年代》在央视一套首播，饰演高君曼。
抓狂2017饰演任宝儿导演周振荣主演惠英红，韩朔，鲍起静
香珀2017饰演兰香导演陈鹏翱主演刘云龙，尹治，常荻
国宝疑云2014-04-18饰演香云导演车径行主演李泰延，李菁，田亮
小李广花荣2013-03-14饰演潇潇导演黄祖权主演陈浩民，何中华，吴毅将
绝对搭档2012-12-06饰演郑敏导演王路沙主演王卓
午夜凶梦2011-11-25饰演方蕾导演叶伟英主演阿娇，黄维德，关智斌，吴建飞
红河劫2010-05-20饰演梅措导演刘小宁主演艾瑞克(德国)，约翰(德国)，周明汕，姬他，赵宁
河长2010-01-01饰演成晨导演张鑫主演吕良伟，牛犇
高考19772009-04-03饰演陈琼导演江海洋主演孙海英，王学兵，赵有亮
都市没有地平线2003-12-01饰演林小丹导演乔梁主演林依轮
觉醒年代2021-2-1饰演高君曼
大舜2015-07-26饰演季好导演吴子牛主演赵文瑄，沈傲君，聂远
给幸福下订单2015-06-04饰演柳悦导演张晓光主演何晟铭，李解，李宇菲
婚姻时差2015-05-02饰演赵晓菲导演李牧鸽主演王志飞，江珊，黄勐，谢园，杨皓宇
金战2014-06-10饰演罗天晴导演刘心刚主演黄觉，张博，潘之琳
大盛魁2013-11-06饰演孙香玉导演王新民主演于震，午马，乔振宇
你是我的亲人2013-06-19饰演李淑霞导演延艺主演姚鲁，刘蓓，张延
国家命运2012-10-07饰演秦小阳导演延艺主演刘劲，胡亚捷，何琳
岳母的幸福生活2012-09-05饰演申兰导演王志军，金雷主演王丽云，李勤勤，柳岩
侦探小说2010-07-17饰演唐梦云导演刘新主演冯远征，巫刚，何赛飞
誓言永恒2009-06-04饰演许婉云导演毛卫宁主演高明，江珊，陶飞霏
雾柳镇2009-01-08饰演大红导演黄健中主演张国强，陶泽如，李钰
风满楼2006-03-15饰演茹月导演黄健中主演张敏，侯岩松，吴奇隆
逃亡香格里拉2006饰演竹香导演周晓文主演高虎，侯天来，梁玉瑾
爱本无罪2005-09-26饰演吴依凡导演沈雷主演高曙光，王姬，徐幸
红粉世家2004-09-01饰演苏琪导演李大为主演孙俪，佟大为，郭小冬，杨幂，潘虹
誓言无声2002-08-27饰演许婉云导演毛卫宁主演高明，赵峥，王海燕
影视类
2011年度黔沿榜“年度女演员”奖（获奖）
2005浙江省第十六届电视“牡丹奖”杰出演员奖《爱本无罪》（获奖）
2004中国100影视新星榜“最具潜力女演员”奖（获奖）
周显欣低调优雅内敛知性，才情兼备的她被称为“中国第一知性女明星”，又因外表酷似巩俐，在演艺圈有“小巩俐”之称。周显欣微笑中端庄而平静，没有丝毫外露的娇媚，造型也恰到好处。在接受电影网的专访时，即使问题再尖锐，她也淡若秋水地将之化解，是一个睿智的女人（央视《光影星播客》导演评价）。
