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2003年，还在杭州艺校上学的叶祖新被选中出演《情断上海滩》而进入演艺圈。
2005年，参演古装电视剧《李小环与苗翠花》，饰演方世玉；同年，参演古装宫斗电视剧《大清后宫》，饰演少年道光帝。
2006年，参演家庭伦理电视剧《死去活来》，饰演樊涛；参演古装历史电视剧《皇上二大爷》，饰演赵金山。
2008年，参演战争历史电视剧《父亲的战争》，饰演彭龙。
2009年，参演古装历史电视剧《杨贵妃秘史》，饰演韦坚；同年参演家族斗争电视剧《大管家》，饰演李复修；参演战争历史电视剧《内线》，饰演苏子童。
2010年，参演古装历史电视剧《大唐女巡按》，饰演欧阳；参演古装神话电视剧《活佛济公2》，分饰必清、瘦仙童两角；参演寻亲电视剧《杜鹃的女儿》，饰演小吴。
2011年，参演穿越电视剧《步步惊心》，饰演十爷；参演古装搞笑电视剧《怪侠欧阳德》，饰演淳贝勒。
2012年，参演爱情励志电视剧《错点鸳鸯》，饰演冷刚；参演传奇抗战题材电视剧《五台山抗日传奇之女尼排》，饰演任松良；参演古装历史电视剧《薛平贵与王宝钏》，饰演叶公公；参演战争历史电视剧《向着胜利前进》，饰演何医生；参演古装武侠电视剧《新白发魔女传》，饰演辛龙子；在古装历史传奇电视剧《隋唐英雄》中饰演裴元庆。
2014年，参演古装神话电视剧《欢天喜地俏冤家》，饰演高富帅；参演都市爱情电视剧《步步惊情》，饰演JACK；参演古装搞笑爱情电视剧《犀利仁师》，饰演范大同；参演都市爱情电视剧《说好的幸福》，饰演许诺；参演古装历史传奇电视剧《隋唐英雄4》，饰演薛丁山。
2015年，参演《蜀山战纪之剑侠传奇》，饰演医术不凡的张馅饼；8月参演的抗日电视剧《铁在烧》在浙江、安徽卫视播出，饰演走上歧路悲剧收场的丁丑娃；9月主演的爱情喜剧电影《穷途》上映，饰演前往苗寨寻找药方的男主角邹孝宇；参演都市情感电视剧《爱情万万岁》，饰演为爱痴狂的90后新新人类金波；11月参演庄园爱情电视剧《我们的秘密》，饰演为情所苦的造型师罗仁；11月与黄世超、杨世瀚、张思帆共同演唱的电视剧《蜀山战纪》片尾曲《我就是我》单曲发布。12月主演民国动作悬疑电视剧《左眼诡事》，饰演左眼能看到鬼魂的男主角尹明涯。
2016年，8月参演都市剧《一粒红尘》，饰演痴情的酒吧老板闵朗。12月，主演的青春励志偶像剧《食全食美》开机，饰演男主角打假卫士吴佑。
2017年，参演的悬疑电影《嫌疑人X的献身》在中国大陆上映，饰演破案的线索人物罗淼警官。
2018年，参演的现代剧《橙红年代》播出，饰演正义青年贝小帅。
2019年，参演电视剧《我们的西南联大》。
2020年，与韩庚、王晓晨等人合作主演的都市情感剧《还没爱够》在江苏卫视播出；4月，参演的古代传奇剧《清平乐》播出，他在剧中饰演内侍总管张茂则。
清平乐2020-04-07饰演张茂则导演张开宙主演王凯、江疏影
还没爱够2020-01-05饰演汪聪导演王迎主演王晓晨、韩庚、张晓晨
橙红年代2018-09-17饰演贝小帅导演刘新主演陈伟霆、马思纯
蜀山战纪2踏火行歌2018-01-30饰演张馅饼(友情出演)导演黄伟杰主演雨婷儿、陈哲远、吴奇隆、聂子皓
食全食美2018饰演吴佑导演王晓明主演程砚秋
一粒红尘2017饰演闵朗导演宋洋主演吴奇隆、颖儿、米露
左眼诡事2016-10-19饰演尹明涯导演聂军主演王秋紫、张璇、康磊
蜀山战纪之剑侠传奇2016-01-16饰演张馅饼导演黄伟杰主演赵丽颖、陈伟霆、吴奇隆、文咏珊
我们的秘密2016饰演罗仁导演林添一主演韩栋、蒋梦婕、吕颂贤
爱情万万岁2015-12-18饰演金波导演刘新主演刘涛、黄觉、张凯丽
铁在烧2015-08-25饰演丁丑娃导演刘新主演王雷、刘涛、齐奎
说好的幸福2015饰演许诺导演阮志强主演蒋梦婕、朱佳煜
美人制造2014-09-07饰演袁客师导演李慧珠主演金世佳、杨蓉、张哲翰
欢天喜地俏冤家2014-07-22饰演高福帅导演刘逢声主演李易峰、颖儿
犀利仁师2014-06-04饰演范大同导演黄伟杰主演吴奇隆、刘诗诗、吴映洁
步步惊情2014-04-22饰演JACK导演李国立主演吴奇隆、刘诗诗、孙艺洲
隋唐英雄42014-03-23饰演薛丁山导演李翰韬主演孙耀琦、张卫健、黄海冰
错点鸳鸯2014-02-20饰演冷刚导演谭锐铭主演赵丽颖、戚迹、韩栋
隋唐英雄32014-01-28饰演薛丁山导演李翰韬主演郑国霖、张卫健、刘晓庆
向着胜利前进2013-09-17饰演何医生导演林建中主演吴奇隆、甘婷婷、王新
五台山抗日传奇之女尼排2013-01-24饰演任松良导演李翰韬主演张卫健、李彩桦
隋唐英雄2012-12-03饰演裴元庆导演李翰韬主演蒲巴甲、张睿、张瑞希
新白发魔女传2012-09-14饰演辛龙子导演黄伟杰主演吴奇隆、马苏
活佛济公32012-07-15饰演必清导演王伟廷、杨健武主演陈浩民、林子聪、陈紫函、张亮
薛平贵与王宝钏2012-04-19饰演叶公公导演林添一主演陈浩民、宣萱、馨子、张迪
怪侠欧阳德2011-12-19饰演淳贝勒导演林添一、左孝虎主演小沈阳、林江国、李晟、张亮
步步惊心2011-09-10饰演十阿哥导演李国立主演刘诗诗、吴奇隆、郑嘉颖
活佛济公22011-07-27饰演必清导演林添一主演陈浩民、林子聪、林江国、馨子
大唐女巡按2011-07-07饰演欧阳导演尤小刚主演钟欣桐、陈浩民、姬晨牧
杜鹃的女儿2011-01-08饰演小吴导演刘二威主演宋佳、李立
大管家2010-11-28饰演李复修导演吴锦源主演宁静、关礼杰
内线2010-09-27饰演苏子童导演陶玲玲主演孙淳、钟汉良、孙菲菲
杨贵妃秘史2010-04-27饰演韦坚导演尤小刚主演殷桃、黄秋生
父亲的战争2009-12-30饰演彭龙导演马功伟主演李雪健、黄海波
李小环与苗翠花2008-02-12饰演方世玉导演杨绍鸿主演郭蔼明、田海蓉、罗家英
死去活来2007-11-07饰演樊涛导演尤小刚主演刘蓓、刘蓓
大清后宫2006-07-10饰演少年道光导演张轩南主演黄维德、胡静、陈浩民
情断上海滩2005-12-01饰演孙伟导演尤小刚主演陈龙、戴娇倩、刘冠翔
皇上二大爷2006-00饰演赵金山导演刘仕裕主演王刚、李修贤、陈好
白色情人梦2005-00饰演谢秘书导演尤小刚主演汤镇宗、张晨光、邬倩倩
嫌疑人x的献身2017-03-31饰演罗淼导演苏有朋主演王凯、张鲁一
穷途2015-09-03饰演邹孝宇导演刘彬杰主演白凯南、雪村、念贤儿
汉太尉杨震2007饰演安帝导演杨小波主演海波
吝啬男友2007饰演白桦导演杨小波主演陈大伟
影视类
2013 风尚权力榜颁奖典礼年度飞跃新人奖 （获奖）
2011 影视新势力盛典影视新势力奖 （获奖）
2011 乐视影视盛典最期待古装电视剧奖 步步惊心 （获奖）
叶祖新，时而搞怪卖萌，时而深情凝望，诙谐的动作与明朗的笑容相得益彰，尽展其帅气的多面性。（中国日报网评价）叶祖新在《隋唐英雄》中所诠释的薛丁山，别与以往的角色，帅气的英姿驾驭于骏马之上，饱含深情的双眸让人感慨。（新民网评价）
叶祖新凭借自身细腻的演技将《铁在烧》中的丁丑娃诠释的有血有肉，爱恨鲜活。（网易娱评）
戏外的他孝顺父母又很体贴照顾别人，被赞是暖男。（新华网、搜狐娱评）
